第
一
部分
实验基本知识
第
二
部分
生物化学实验
目 录
第一章 实验须知
........................................................................ 3
第二章 实验基本操作............................................................... 5
第三章 实验样品的制备
........................................................ 13
第四章 常用的实验方法与技术
.......................................... 17
第一节 分光光度法
................................................ 17
第二节 电泳技术..................................................... 24
第三节 层析技术..................................................... 28
第四节 离心技术..................................................... 34
第五节 印迹技术..................................................... 38
实验1 蛋白质的呈色反应和含量测定
.............................. 45
实验2 蛋白质的沉淀反应
..................................................... 50
实验3 蛋白质等电点的测定
................................................ 53
实验4 凝胶层析分离法分离血红蛋白与溶菌酶
........... 55
实验5 肝组织中核酸的分离与鉴定
.................................. 58
实验6 酶的特异性
................................................................... 61
VI
生物化学与分子生物学实验教程（第3版）
第
三
部分
分子生物学实验
实验7 影响酶促反应速度的因素
....................................... 63
实验8 碱性磷酸酶的活性测定和
Km值测定................... 66
实验9 新斯的明对乙酰胆碱酯酶的抑制作用
................ 68
实验10 阿卡波糖对
α-葡萄糖苷酶的抑制作用............. 70
实验11 食物中维生素
C的提取和定量
........................... 72
实验12 胡萝卜素柱层析分离法
.......................................... 74
实验13 血糖含量的测定
....................................................... 76
实验14 饱食和饥饿小白鼠肝糖原含量的比较
............. 79
实验15 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇
.................. 81
实验16 血清尿素氮测定（二乙酰一肟法）
.................... 83
实验17 血清蛋白乙酸纤维素薄膜电泳
........................... 85
实验18 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
................................ 88
实验19 转氨基作用与氨基酸纸层析
................................ 90
实验20 血清谷丙转氨酶的测定
......................................... 93
实验21 血清
γ-球蛋白的提纯及鉴定................................ 96
实验22 SDS
-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定
蛋白质的相对分子量............................................ 100
实验23 基因组
DNA的分离提取
..................................... 109
实验24 质粒
DNA的提取
....................................................111
实验25 核酸浓度的测定
......................................................114
实验26 琼脂糖凝胶电泳检测
DNA
..................................116
实验27 DNA的酶切
..............................................................119
实验28 DNA重组、转化与鉴定
...................................... 123
实验29 Southern印迹转移
................................................ 127
实验30 Western Blot检测蛋白质
................................... 132
实验31 RT
-PCR
..................................................................... 135
第
四
部分
附 录
目 录
附录1 实验室安全及防护知识
.......................................... 141
附录2 分子生物学实验常用试剂及溶液、
缓冲液的配制
............................................................ 144
附录3 常用计量单位及符号
.............................................. 153
附录4 希腊字母表
................................................................. 154
参考文献....................................................................................... 155
